质粒是一种闭合环状的双链超螺旋 DNA 分子，广泛应用于疫苗制备及细胞基因治疗（CGT）领域，如 DNA 疫苗、裸质粒基因载体、腺相关病毒（AAV）和慢病毒载体等。通常质粒是以大肠杆菌（ E.coli ）为宿主进行生产，最有代表性的宿主菌是由大肠杆菌 K-12 所衍生出的 DH5a、Stbl3、Top10 等菌株。在质粒的生产及纯化过程可能会存在 E.coli 宿主细胞蛋白（E.coli HCP）残留的污染，这些残留 HCP 会给质粒后续应用带来风险，如在体内产生免疫反应，因此要对 E.coli HCP 的残留量进行控制。不同于常规的使用 E.coli 表达重组蛋白的工艺过程，质粒的生产纯化最常用工艺是碱裂解工艺。本试剂盒所采用的抗原是基于 E.coli 碱裂解工艺过程制备的变性 E.coli HCP，同时采用碱裂解工艺 E.coli HCP 免疫动物获得专属抗体。本产品适用于采用碱裂解工艺提取的质粒中间品、原液及终产品的 E.coli HCP 定量检测。 首次使用本试剂盒前建议先完成产品的适用性研究，确认样本基质是否存在干扰以及合适的样本检测稀释条件。 产品特点 1、定量范围：1.0~250 ng/mL； 2、灵敏度：E.coli HCP检测下限（LOD）不高于0.4ng/mL，定量下限：1.0ng/mL； 3、精密度：定量限范围内板内、板间样本浓度变异系数均<20%； 4、特异性：与CHO、Vero、HEK 293等宿主蛋白均无交叉反应； 产品优势 试剂盒溯源体系完善 组分（校准品、抗体）自主制备开发，原料自主可控，试剂盒溯源体系完善； HCP制备工艺有代表性 选用具有代表性的E.coli细胞株；模拟实际样本制备工艺； 特异性高 覆盖率高达84%；包含绝大部分E.coli HCP（共1000多种HCP）； 操作简单性能稳定 两步法设计，操作简单快捷，结果稳定 供应链安全 批产量大，货期短，供货稳定；
E.coli宿主蛋白残留检测试剂盒 性能指标 结果 1.线性范围 定量范围 1.0~250 ng/mL PASS 四参数拟合R2 >0.99 PASS 2.准确性 企业参考品偏差 RSD≤20% PASS 3.回收率 模拟样本回收率 70%~130% PASS 4精密度 批内差 CV≤15% PASS 批间差 CV≤20% PASS 5.特异性 1μg/mL CHO，HEK 293、 Vero HCP无干扰 PASS 6.干扰性 2.5×TE缓冲液无干扰 PASS 7.定量上限 1.0 ng/mL PASS 8.定量下限 250 ng/mL PASS 9.耐用性 仪器适用性 MD SpectraMax i3x/BioTek ELx800/ Thermo Fish Multiskan TM SkyHigh PASS 10.稳定性 有效期 2~8℃保存12月 PASS
